Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LTβR Double Nickase Plasmid (h): sc-402774-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das LTβR Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- LTβR Double-Nickase-Plasmid (h) und LTβR Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf LTBR abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: LTβR: sc-398929
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
LTβR Double Nickase Plasmid (h) | sc-402774-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LTβR Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402774-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane **LTBR**-Gen kodiert den Lymphotoxin‑β‑Rezeptor (LTβR), ein Mitglied der TNF‑Rezeptor‑Superfamilie, das an Lymphotoxin‑α1β2 und LIGHT bindet und so die Kommunikation zwischen Stromazellen und Immunzellen koordiniert. Die LTβR‑Signalübertragung aktiviert über TRAF‑Adapter sowohl kanonische als auch nicht‑kanonische NF‑κB‑Signalwege und prägt dadurch die Chemokinproduktion, die Lymphorganogenese sowie den Erhalt der Architektur lymphatischen Gewebes. In Immunzellen und stromalen Kompartimenten reguliert LTβR entzündliche Genprogramme, antigenpräsentierende Mikroumgebungen und barriereassoziierte Antworten. Eine fehlregulierte LTβR‑Aktivität wird mit chronischer Entzündung und Autoimmunität in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext des Umbaus der Tumormikroumgebung und von Mechanismen der Immunflucht untersucht.
LTβR Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des LTBR-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von LTBR abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die LTBR-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit LTBR-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.