LST1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421476

Descripción general

Lst1 codifica el transcrito 1 específico de leucocitos (LST1), una pequeña proteína inmunorreguladora asociada a membrana y enriquecida en linajes mieloides como monocitos, macrófagos y microglía. LST1 participa en la modulación de la activación de las células inmunitarias innatas, su migración y la comunicación célula–célula, con vínculos descritos con redes de señalización asociadas a ITAM, la remodelación del citoesqueleto y programas transcripcionales inflamatorios. En tejidos de ratón, la expresión de Lst1 se correlaciona con estados de macrófagos y microglía y se utiliza comúnmente como marcador de infiltración inmunitaria y activación mieloide. Se han observado firmas mieloides asociadas a LST1 alteradas en contextos inflamatorios y neuroinflamatorios y en microambientes inmunitarios tumorales, lo que respalda estudios mecanísticos de la regulación inmunitaria y de fenotipos mieloides relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LST1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lst1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lst1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lst1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LST1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lst1 para la investigación de la señalización de LST1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Lst1 críticos para la función de LST1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lst1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LST1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LST1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lst1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LST1 (m) y el plásmido HDR LST1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lst1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lst1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.