Plasmide Double Nickase (m) LRRC34: sc-428084-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LRRC34 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LRRC34 Double Nickase (m) et le plasmide LRRC34 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lrrc34. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LRRC34 | sc-428084-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LRRC34 | sc-428084-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Lrrc34** code **LRRC34**, une protéine contenant des répétitions riches en leucine (LRR), impliquée dans des réseaux d’interactions protéine–protéine qui soutiennent l’organisation cellulaire et la signalisation. Bien que ses partenaires moléculaires ne soient pas encore entièrement caractérisés, les protéines à LRR participent fréquemment à des fonctions d’échafaudage influençant la dynamique du cytosquelette, le trafic membranaire et des programmes transcriptionnels associés à la différenciation. L’expression de **Lrrc34** a été rapportée dans la lignée germinale et au cours des stades précoces du développement, ce qui suggère des rôles potentiels dans la régulation de l’état des cellules souches/progénitrices et l’engagement de lignée. La dérégulation des protéines à répétitions riches en leucine est largement impliquée dans les anomalies du développement et le remaniement de la signalisation associé au cancer, faisant de **Lrrc34** une cible utile pour des études mécanistiques de ces voies.
LRRC34 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lrrc34 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lrrc34. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lrrc34. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lrrc34.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.