LRRC26 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432708

Descripción general

Lrrc26 codifica LRRC26, una proteína auxiliar que contiene repeticiones ricas en leucina y que modula la compuerta (gating) de los canales de potasio BK (de gran conductancia) activados por Ca2+ y por voltaje. Al desplazar la activación de los canales BK hacia potenciales de membrana más fisiológicos, LRRC26 influye en la excitabilidad de la membrana, la dinámica de la señalización de Ca2+ y los procesos de transporte iónico epitelial. Esta función reguladora vincula a LRRC26 con vías que controlan el tono del músculo liso, la función epitelial secretora y el acoplamiento estímulo-secreción. Las alteraciones en la regulación de los canales BK y en la expresión de subunidades auxiliares se han asociado con disfunción fisiológica en tejidos excitables y epiteliales, lo que respalda el uso de modelos de Lrrc26 para investigar mecanismos relevantes para canalopatías y la homeostasis tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LRRC26 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lrrc26 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lrrc26 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lrrc26 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LRRC26.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lrrc26 para la investigación de la señalización de LRRC26, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Lrrc26 críticos para la función de LRRC26
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lrrc26 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LRRC26 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LRRC26 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lrrc26. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LRRC26 (m) y el plásmido HDR LRRC26 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lrrc26 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lrrc26 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.