Plasmide Double Nickase (h) LRP4: sc-401708-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LRP4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LRP4 Double Nickase (h) et le plasmide LRP4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LRP4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LRP4 | sc-401708-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LRP4 | sc-401708-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRP4 (low-density lipoprotein receptor–related protein 4) est un récepteur transmembranaire à passage unique de la famille des récepteurs des LDL, qui joue le rôle d’échafaudage majeur pour les interactions des ligands extracellulaires et la transduction du signal à la surface cellulaire. À la jonction neuromusculaire, LRP4 se lie à l’agrine et coopère avec MuSK pour initier l’agrégation des récepteurs et la spécialisation postsynaptique, reliant des signaux extracellulaires à l’organisation du cytosquelette et à la synaptogenèse. En biologie osseuse, LRP4 module la signalisation Wnt/β-caténine en interagissant avec des antagonistes Wnt sécrétés tels que la sclérostine et DKK1, influençant l’activité des ostéoblastes et la régulation de la masse osseuse. Des altérations génétiques de LRP4 ont été associées à des phénotypes neuromusculaires et squelettiques congénitaux, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude du développement synaptique et des mécanismes de remodelage osseux.
LRP4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LRP4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LRP4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LRP4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LRP4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.