Plásmido Doble Nickase (m) LRP16: sc-430699-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)LRP16 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LRP16 (m) y el plásmido de doble nickasa LRP16 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Macrod1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) LRP16 | sc-430699-NIC | 20 µg | $410.00 |
Macrod1 codifica LRP16, una proteína nuclear que contiene un macrodómino, se une al mono-ADP-ribosa y participa en la señalización de ADP-ribosilación dependiente de PARP. En células de ratón, LRP16 se ha relacionado con la regulación de procesos asociados a la cromatina, incluido el control transcripcional, las respuestas al daño del ADN y el mantenimiento del genoma acoplado al ciclo celular. A través de estas funciones, MACROD1/LRP16 se estudia en vías que conectan la señalización de receptores nucleares, las respuestas al estrés y la dinámica de modificaciones postraduccionales. La expresión alterada o la actividad desregulada de LRP16 se investiga con frecuencia en contextos de control de la proliferación e inestabilidad genómica relevantes para la biología del cáncer y modelos de señalización inflamatoria.
LRP16 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Macrod1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Macrod1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Macrod1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Macrod1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.