LPLUNC3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406344

Visão geral

BPIFB3 (LPLUNC3) é um membro secretado da família de proteínas que contêm o dobramento BPI, enriquecida em epitélios mucosos, onde se acredita que contribua para a defesa inata nas superfícies das vias aéreas e do trato aerodigestivo superior. As proteínas dessa família interagem com lipídios associados a microrganismos e podem modular a homeostase da barreira epitelial ao influenciar a sinalização inflamatória e as respostas antimicrobianas. A expressão de BPIFB3 responde a estímulos ambientais e inflamatórios e tem sido associada à regulação de programas de diferenciação epitelial e de interações hospedeiro–microrganismo. Alterações nos níveis de BPIFB3/LPLUNC3 foram relatadas em diferentes estados inflamatórios das vias aéreas e em patologias associadas ao epitélio, sustentando sua utilidade como marcador e como nó mecanístico em pesquisas de biologia mucosa.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LPLUNC3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BPIFB3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BPIFB3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BPIFB3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LPLUNC3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BPIFB3 para a investigação da sinalização de LPLUNC3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BPIFB3 críticos para a função LPLUNC3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BPIFB3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LPLUNC3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LPLUNC3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BPIFB3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LPLUNC3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LPLUNC3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BPIFB3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BPIFB3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.