Plasmide Double Nickase (h) LOXL2: sc-401021-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LOXL2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LOXL2 Double Nickase (h) et le plasmide LOXL2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LOXL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LOXL2 Antibody (3C5): sc-293427
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LOXL2 | sc-401021-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LOXL2 | sc-401021-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LOXL2 (lysyl oxidase like 2) code une amine oxydase sécrétée dépendante du cuivre, qui catalyse la désamination oxydative de résidus lysine dans le collagène et l’élastine, favorisant la réticulation de la matrice extracellulaire et le remodelage tissulaire. Au-delà de la maturation de la matrice, LOXL2 influence l’adhésion et la migration cellulaires ainsi que la mécanotransduction en modulant la rigidité matricielle et la signalisation dépendante des intégrines, et a été associé aux programmes de transition épithélio-mésenchymateuse et aux réseaux répondant à l’hypoxie. Une expression ou une activité dérégulée de LOXL2 est liée au remodelage fibrotique et à la dynamique du microenvironnement tumoral, ce qui en fait un nœud d’étude utile pour la biologie de la matrice extracellulaire, le dialogue stroma–épithélium et les phénotypes associés à l’invasion dans des systèmes cellulaires humains.
LOXL2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LOXL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LOXL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LOXL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LOXL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.