Plasmide Double Nickase (m) LONP1: sc-428748-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LONP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LONP1 Double Nickase (m) et le plasmide LONP1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lonp1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LONP1 | sc-428748-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LONP1 | sc-428748-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lonp1 code pour LONP1, une protéase/chaperonne à sérine dépendante de l’ATP, localisée dans la matrice mitochondriale, qui régule la protéostasie mitochondriale en repliant ou en dégradant les protéines endommagées, mal repliées et oxydées. En contrôlant le renouvellement des composants de la chaîne respiratoire et de facteurs régulateurs, LONP1 soutient la phosphorylation oxydative, le maintien de l’ADN mitochondrial et des programmes d’adaptation au stress tels que la réponse mitochondriale aux protéines mal repliées. La perturbation de la fonction de LONP1 altère la dynamique mitochondriale, augmente les espèces réactives de l’oxygène et compromet l’homéostasie bioénergétique, reliant cette voie à des phénotypes de dysfonction mitochondriale pertinents pour la neurodégénérescence, le stress cardiométabolique et le remodelage métabolique associé au cancer. Lonp1 chez la souris constitue donc un nœud clé pour étudier les mécanismes de contrôle qualité qui intègrent la protéolyse, le remodelage dépendant de l’ATP et la signalisation rédox dans les mitochondries.
LONP1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lonp1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lonp1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lonp1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lonp1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.