LONP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428748-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LONP1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LONP1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LONP1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lonp1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LONP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428748-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LONP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428748-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lonp1 codifica a LONP1, uma protease/chaperona de serina dependente de ATP, localizada na matriz mitocondrial, que regula a proteostase mitocondrial ao reenovelar ou degradar proteínas danificadas, mal dobradas e oxidadas. Ao controlar a renovação de componentes da cadeia respiratória e de fatores regulatórios, a LONP1 sustenta a fosforilação oxidativa, a manutenção do DNA mitocondrial e programas adaptativos ao estresse, como a resposta mitocondrial a proteínas mal dobradas (UPRmt). A disfunção da LONP1 altera a dinâmica mitocondrial, eleva as espécies reativas de oxigênio e compromete a homeostase bioenergética, vinculando essa via a fenótipos de disfunção mitocondrial relevantes para a neurodegeneração, o estresse cardiometabólico e a remodelação metabólica associada ao câncer. Assim, a Lonp1 em camundongo é um nó-chave para estudar mecanismos de controle de qualidade que integram proteólise, remodelamento dependente de ATP e sinalização redox nas mitocôndrias.
LONP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lonp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lonp1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lonp1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lonp1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.