Plasmide Double Nickase (h) LOC729991-MEF2B: sc-405289-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LOC729991-MEF2B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LOC729991-MEF2B Double Nickase (h) et le plasmide LOC729991-MEF2B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BORCS8-MEF2B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LOC729991-MEF2B | sc-405289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LOC729991-MEF2B | sc-405289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BORCS8-MEF2B code un produit protéique chimérique BORCS8–MEF2B (LOC729991-MEF2B) qui relie un composant du complexe BORC, lequel régule le positionnement des lysosomes et le transport dépendant des kinésines, à MEF2B, un facteur de transcription à boîte MADS impliqué dans la régulation de gènes dépendante de l’activité. La signalisation de la famille MEF2 intègre des signaux calcium/MAPK pour contrôler des programmes transcriptionnels régissant la prolifération, la différenciation et les réponses au stress, tandis que le trafic associé à BORC influence l’autophagie et l’homéostasie endolysosomale. Une dysrégulation de MEF2B a été associée à une altération du contrôle transcriptionnel dans la biologie lymphoïde, notamment via des altérations génomiques récurrentes rapportées dans des malignités des cellules B, ce qui rend ce locus pertinent pour disséquer le dialogue entre transcription et trafic intracellulaire dans des contextes cellulaires pertinents pour la maladie.
LOC729991-MEF2B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BORCS8-MEF2B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BORCS8-MEF2B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BORCS8-MEF2B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BORCS8-MEF2B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.