Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) LMP7: sc-402382-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LMP7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LMP7 Double Nickase (h) et le plasmide LMP7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PSMB8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LMP7 Antibody (A-12): sc-365699
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LMP7 | sc-402382-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LMP7 | sc-402382-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **PSMB8** code **LMP7**, une sous-unité β catalytique de l’immunoprotéasome induite par l’interféron‑γ, qui remplace la sous-unité constitutive du protéasome **PSMB5** afin de modifier la spécificité protéolytique. LMP7 contribue au fonctionnement du système ubiquitine‑protéasome en façonnant la génération de peptides destinés au traitement des antigènes par le CMH de classe I, influençant ainsi la surveillance immunitaire adaptative et la signalisation inflammatoire. Le remodelage de l’activité du protéasome via l’induction de **PSMB8** est lié à la différenciation des cellules immunitaires et aux réponses au stress, et une dérégulation de la composition de l’immunoprotéasome a été associée à des états inflammatoires chroniques et à l’auto-immunité. Des variations pathogènes de **PSMB8** ont également été reliées à des phénotypes auto-inflammatoires caractérisés par une signalisation cytokinique aberrante et une protéostasie altérée.
LMP7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PSMB8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PSMB8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PSMB8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PSMB8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.