Plasmide Double Nickase (m) LMO4: sc-421448-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LMO4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LMO4 Double Nickase (m) et le plasmide LMO4 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lmo4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LMO4 Antibody (4H8): sc-293440
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LMO4 | sc-421448-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LMO4 | sc-421448-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lmo4 code pour « LIM domain only 4 » (LMO4), une protéine adaptatrice nucléaire de type LIM-only qui assemble des complexes transcriptionnels multiprotéiques et module des programmes d’expression génique dépendants du contexte. Dans les tissus murins, LMO4 contribue à l’organisation du développement et aux décisions de destinée cellulaire en coordonnant les interactions entre partenaires se liant aux domaines LIM et d’autres régulateurs transcriptionnels, influençant des processus tels que la différenciation, la prolifération et la fonction neuronale. LMO4 a été associée à des voies impliquées dans la régulation transcriptionnelle et l’intégration des signaux, notamment des réseaux participant au développement épithélial et neural. Une activité dérégulée de LMO4 a été corrélée à un contrôle transcriptionnel aberrant observé dans des modèles de tumorigenèse et de phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui étaye son utilisation comme nœud mécanistique dans les études de régulation génique.
LMO4 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lmo4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lmo4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lmo4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lmo4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.