LMO3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417939-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LMO3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LMO3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LMO3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LMO3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LMO3 Anticorpo (1A8): sc-517019
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LMO3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417939-NIC | 20 µg | $410.00 |
LMO3 codifica um regulador transcricional do tipo “LIM-only”, composto em grande parte por domínios LIM de ligação a zinco que atuam como módulos de interação proteína–proteína, e não como motivos de ligação direta ao DNA. Ao montar complexos multiproteicos com fatores de transcrição e cofatores, o LMO3 ajuda a moldar programas de expressão gênica ligados à diferenciação neuronal, à orientação axonal e ao controle, dependente do contexto, da proliferação e da sobrevivência celular. A expressão desregulada de LMO3 foi relatada em múltiplos contextos tumorais, incluindo neuroblastoma e outros cânceres sólidos, nos quais frequentemente se associa a estados de diferenciação alterados e fenótipos invasivos. Essas propriedades tornam o LMO3 um alvo útil para estudar redes transcricionais do desenvolvimento, reprogramação oncogênica e mecanismos de especificação de linhagem.
LMO3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LMO3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LMO3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LMO3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LMO3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.