Plasmide Double Nickase (m) LMO2: sc-421447-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LMO2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LMO2 Double Nickase (m) et le plasmide LMO2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lmo2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LMO2 Antibody (1A9-1): sc-65736
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LMO2 | sc-421447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LMO2 | sc-421447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lmo2 code la protéine LMO2 (« LIM domain–only »), un adaptateur nucléaire qui assemble des complexes transcriptionnels multiprotéiques contrôlant les décisions de destinée cellulaire. Dans l’hématopoïèse murine, LMO2 participe à des réseaux régulateurs avec des facteurs tels que TAL1/SCL, les protéines GATA et LDB1 afin de coordonner des programmes d’expression génique qui soutiennent le maintien des cellules souches et progénitrices, la différenciation érythroïde et le développement vasculaire. Les circuits transcriptionnels associés à LMO2 s’articulent avec des processus plus larges de régulation de la chromatine et de spécification de lignée, qui influencent la dynamique de prolifération et de différenciation. Une expression dérégulée de Lmo2 ou une composition altérée des complexes est largement utilisée comme modèle pour étudier les mécanismes de reprogrammation transcriptionnelle leucémogène et la biologie des maladies hématologiques associées, in vivo et en cultures cellulaires.
LMO2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lmo2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lmo2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lmo2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lmo2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.