Plasmide Double Nickase (h) LLGL2: sc-404667-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LLGL2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LLGL2 Double Nickase (h) et le plasmide LLGL2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LLGL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LLGL2 Antibody (A-4): sc-376857
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LLGL2 | sc-404667-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LLGL2 | sc-404667-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LLGL2 (lethal giant larvae homolog 2) code une protéine corticale de polarité conservée, qui contribue à l’organisation apico-basale, à la stabilité des jonctions d’adhérence et à l’architecture des tissus épithéliaux. Elle agit au sein de réseaux de polarité liés au module Scribble/Lgl/Dlg, en coordonnant le trafic membranaire, la dynamique du cytosquelette et la division cellulaire asymétrique. Par ces processus, LLGL2 influence des programmes de migration et de prolifération cellulaires, fréquemment remaniés lors du remodelage épithélial et de la transformation oncogénique. Une expression ou une localisation altérées de LLGL2 ont été associées à une rupture de l’intégrité jonctionnelle et à des modifications du comportement des cellules tumorales dans de multiples contextes cancéreux, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la perte de polarité et de phénotypes liés à la métastase.
LLGL2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LLGL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LLGL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LLGL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LLGL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.