LKLF/KLF2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400918

Descripción general

KLF2 (también conocido como LKLF) codifica un factor de transcripción tipo Krüppel con dedos de zinc que ayuda a mantener la homeostasis de las células endoteliales e inmunitarias coordinando programas génicos sensibles al estrés de cizallamiento. En el endotelio vascular, KLF2 integra la mecanotransducción con el control transcripcional de vías antiinflamatorias, antitrombóticas y de estabilización de la barrera, incluida la modulación de la señalización del óxido nítrico y de la expresión de moléculas de adhesión. En los linajes hematopoyéticos, KLF2 influye en la quiescencia, el tráfico y la diferenciación de los linfocitos T mediante la regulación de receptores de quimiocinas y de redes transcripcionales asociadas a la activación. La actividad desregulada de KLF2 se ha vinculado con la inflamación vascular y procesos relacionados con la aterosclerosis, y se ha informado de una expresión alterada en múltiples contextos de cáncer y disrregulación inmunitaria, lo que respalda su uso como un nodo funcional en estudios de disección de vías.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LKLF/KLF2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KLF2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KLF2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KLF2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LKLF/KLF2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KLF2 para la investigación de la señalización de LKLF/KLF2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KLF2 críticos para la función de LKLF/KLF2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KLF2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LKLF/KLF2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LKLF/KLF2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KLF2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LKLF/KLF2 (h) y el plásmido HDR LKLF/KLF2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KLF2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KLF2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.