Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Limd1: sc-404413-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Limd1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Limd1 Double Nickase (h) et le plasmide Limd1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LIMD1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Limd1 Antibody (H-4): sc-271448
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Limd1 | sc-404413-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Limd1 | sc-404413-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LIMD1 code Limd1, une protéine adaptatrice contenant un domaine LIM, qui agit comme échafaudage dans le noyau et le cytoplasme afin de coordonner les interactions protéine–protéine. Limd1 a été impliquée dans le contrôle transcriptionnel et l’intégration des signaux au niveau de nœuds régulateurs de la croissance, notamment dans la régulation de la voie Hippo via des interactions qui modulent l’activité de YAP/TAZ. Par ces rôles, LIMD1 contribue au contrôle de la prolifération cellulaire, de l’adhérence et des programmes d’expression génique induits par le stress. Une expression altérée de LIMD1 ou une perte génomique a été associée à des phénotypes liés à la tumorigenèse dans de multiples contextes tissulaires, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques du contrôle de la croissance et des interactions entre voies de signalisation.
Limd1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LIMD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LIMD1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LIMD1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LIMD1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.