Plásmido Doble Nickase (h) LIFR: sc-400861-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LIFR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LIFR (h) y el plásmido de doble nickasa LIFR (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LIFR. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LIFR Anticuerpo (A-10): sc-515337
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LIFR | sc-400861-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LIFR | sc-400861-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El receptor del factor inhibidor de la leucemia (LIFR) es un receptor de citocinas de tipo I que se asocia con gp130 para mediar la señalización inducida por LIF y otras citocinas relacionadas de la familia de la IL-6. La unión del ligando promueve la activación de las vías JAK/STAT, MAPK/ERK y PI3K/AKT, coordinando programas transcripcionales que regulan decisiones del destino celular, incluida la diferenciación, la supervivencia y la homeostasis tisular. La señalización dependiente de LIFR se estudia en biología del desarrollo y en contextos de células madre, y se ha asociado una función o expresión alteradas del receptor con un control del crecimiento desregulado y con señalización inflamatoria en múltiples contextos de enfermedad. Como receptor de superficie celular, LIFR también ofrece un punto accesible para analizar la intercomunicación citocina-receptor y el cableado de las vías de señalización aguas abajo.
LIFR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LIFR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LIFR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LIFR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LIFR alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.