Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401229
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LI-cadherin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LI-cadherin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LI-cadherin Anticorpo (H-1): sc-393533
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401229 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDH17 codifica a LI-caderina, uma caderina não clássica enriquecida no epitélio intestinal que medeia a adesão célula–célula dependente de cálcio e contribui para a polaridade epitelial e a função de barreira. Ao contrário das caderinas clássicas, a LI-caderina não possui o domínio canónico de ligação às cateninas, o que a associa a mecanismos distintos que controlam a organização das junções, a arquitetura do tecido e a seleção celular. Alterações na expressão e na localização de CDH17 são frequentemente investigadas no remodelamento epitelial gastrointestinal e em mudanças associadas a tumores nos programas de adesão, invasão e diferenciação. Como molécula de adesão associada a linhagem, a LI-caderina também é usada para estudar como recetores de adesão de membrana se articulam com a regulação do citoesqueleto, a inibição por contacto e sinais do microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LI-cadherin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDH17 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDH17, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDH17 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LI-cadherin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDH17 para a investigação da sinalização de LI-cadherin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDH17 críticos para a função LI-cadherin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDH17 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LI-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDH17. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LI-cadherin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LI-cadherin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDH17 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDH17 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.