Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) LC3B: sc-417828-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LC3B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LC3B Double Nickase (h) et le plasmide LC3B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAP1LC3B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LC3B | sc-417828-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LC3B | sc-417828-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP1LC3B code pour la chaîne légère 3B (LC3B) des protéines associées aux microtubules 1A/1B, un composant central de la machinerie d’autophagie qui subit une lipidation dépendante d’ATG7/ATG3 pour former LC3-II sur les membranes des autophagosomes. LC3B favorise l’allongement du phagophore et la capture de cargaisons via des motifs de type LC3-interacting region (LIR) présents dans des récepteurs d’autophagie sélective tels que p62/SQSTM1, reliant des substrats ubiquitinylés à la formation des autophagosomes. Par ces interactions, LC3B intègre des voies de détection des nutriments et de réponse au stress, notamment les signalisations mTOR et AMPK, afin de réguler la protéostasie et le contrôle qualité des organites. Une autophagie associée à LC3B dérégulée a été impliquée dans la neurodégénérescence, la biologie des infections, les dysfonctionnements métaboliques et l’adaptation au stress liée au cancer, ce qui en fait un marqueur fréquemment utilisé et un nœud mécanistique important en recherche sur l’autophagie.
LC3B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAP1LC3B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAP1LC3B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAP1LC3B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAP1LC3B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.