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Layilin双切口酶质粒(h) | sc-408326-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Layilin双切口酶质粒(h2) | sc-408326-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAYN 编码 layilin,这是一种跨膜的 C 型凝集素样受体,富集于细胞膜褶皱和黏附位点,在这些位置将细胞外信号与皮质肌动蛋白细胞骨架连接起来。Layilin 与富含透明质酸的微环境相关,并与细胞骨架及信号调控因子相互作用,从而影响细胞形态重塑、运动能力以及依赖黏附的信号通路。作为动态细胞–基质界面的组成部分,LAYN 常在迁移程序与免疫–基质相互作用发生改变的研究情境中被关注,包括肿瘤微环境生物学和炎症性组织重塑。多种与疾病相关的转录组数据集中均报道了 LAYN 表达失调,支持将其作为解析黏附与迁移表型的机制性关键节点。
Layilin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LAYN 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LAYN内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LAYN的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LAYN基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。