Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Lamin B2 (h): sc-401873
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Lamin B2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Lamin B2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Lamin B2 Antibody (F-8): sc-377379
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Lamin B2 (h) | sc-401873 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
LMNB2 code la lamine B2, une protéine essentielle de type V appartenant aux filaments intermédiaires de la lamina nucléaire, qui soutient l’architecture de l’enveloppe nucléaire et l’organisation de la chromatine. La lamine B2 contribue à la réplication de l’ADN, à la régulation transcriptionnelle et à la réassemblage nucléaire en mitose, en intégrant des fonctions à la fois structurales et régulatrices dans la mécanique nucléaire et la stabilité du génome. En tant qu’élément du réseau plus large des lamines, elle influence des processus tels que le positionnement des pores nucléaires et l’ancrage des domaines associés à la lamina (LAD), qui façonnent l’état épigénétique et la différenciation cellulaire. La dérégulation des composants de la lamina nucléaire, y compris LMNB2, est liée à des altérations de la morphologie nucléaire et a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et prolifératifs pertinents pour la mécano-biologie et la recherche sur le maintien du génome.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Lamin B2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène LMNB2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du LMNB2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert LMNB2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Lamin B2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en LMNB2 pour l'étude de la signalisation de Lamin B2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de LMNB2 essentiels à la fonction de Lamin B2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de LMNB2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Lamin B2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Lamin B2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus LMNB2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Lamin B2 plasmide HDR (h) et le Lamin B2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie LMNB2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles LMNB2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.