Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Krs-2: sc-403632-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Krs-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Krs-2 Double Nickase (h) et le plasmide Krs-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant STK4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Krs-2 Antibody (H-8): sc-515051
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Krs-2 | sc-403632-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Krs-2 | sc-403632-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STK4 code la kinase sérine/thréonine Krs-2 (également appelée MST1), un composant central du réseau de signalisation Hippo qui contribue à coordonner la survie cellulaire, le contrôle de la prolifération et l’apoptose. Krs-2 phosphoryle des effecteurs en aval qui influencent des programmes transcriptionnels et la dynamique du cytosquelette, et elle s’inscrit également à l’interface de voies de réponse au stress et de l’homéostasie des cellules immunitaires. Dans le noyau, l’activité de STK4 peut moduler des signaux associés à la chromatine et réguler l’expression de gènes pro-apoptotiques lors d’un stress oxydatif ou génotoxique. La dérégulation de la signalisation STK4/Krs-2 a été associée à des altérations du contrôle de la croissance, à une fonction lymphocytaire déficiente et à des phénotypes d’intérêt pathologique dans la recherche en biologie du cancer et en immunologie.
Krs-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus STK4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de STK4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de STK4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de STK4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.