KLF17 Lentiviral Activation Particles (h): sc-414317-LAC

KLF17 (Krüppel-like factor 17) kodiert einen Zinkfinger-Transkriptionsfaktor, der Genexpressionsprogramme reguliert, die mit epithelialer Differenzierung, Zellidentität sowie der transkriptionellen Kontrolle von Proliferation und motilitätsassoziierten Netzwerken verknüpft sind. Als DNA-bindender Regulator ist KLF17 in umfassendere transkriptionelle und chromatinmodulierende Signalwege eingebunden, die linien-/gewebespezifische Expressionszustände und stressresponsive Signalübertragung prägen. Eine veränderte KLF17-Aktivität wurde mit einer dysregulierten epithelial–mesenchymalen Plastizität und Änderungen in invasionsbezogenen transkriptionellen Signaturen in Verbindung gebracht, was KLF17 für Studien zur Tumorprogression und zum metastatischen Potenzial relevant macht. In humanen Modellsystemen wird KLF17 häufig im Hinblick auf seine Auswirkungen auf Zellzustandsübergänge, Migration und die kontextabhängige Regulation nachgeschalteter Zielgene untersucht.

KLF17 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KLF17-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

KLF17 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KLF17-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen KLF17-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KLF17-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.