Plasmide Double Nickase (h) KIF13A: sc-403751-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KIF13A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KIF13A Double Nickase (h) et le plasmide KIF13A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KIF13A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KIF13A | sc-403751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KIF13A | sc-403751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF13A code une protéine motrice des microtubules de la famille kinésine‑3, qui assure un transport dirigé vers l’extrémité plus des compartiments membranaires, façonnant le trafic vésiculaire, la dynamique endosomale et la livraison polarisée de cargaisons dans les cellules en migration et en différenciation. En couplant les microtubules à des vésicules associées à Rab et à des régulateurs de polarité, KIF13A contribue à des processus tels que le recyclage des récepteurs, le remodelage membranaire et la coordination du cytosquelette. Une perturbation du trafic lié à KIF13A peut modifier la sortie des voies de signalisation et le positionnement des organites, avec des implications pour des programmes cellulaires comme la fonction immunitaire, le transport neuronal et la biologie des barrières. Des études génétiques et fonctionnelles ont relié KIF13A à des voies associées à des maladies impliquant le transport intracellulaire et une dérégulation épithéliale ou immunitaire, ce qui motive des investigations mécanistiques dans des modèles de cellules humaines.
KIF13A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KIF13A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KIF13A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KIF13A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KIF13A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.