Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO KID (h): sc-408134
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- KID Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique KID, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KID Antibody (B-9): sc-390640
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO KID (h) | sc-408134 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
KIF22 code pour la chromokinésine KID, un moteur dépendant des microtubules qui se lie à la chromatine et génère les forces d’éjection polaires nécessaires à une congrégation correcte des chromosomes et à la dynamique du fuseau mitotique pendant la mitose. L’activité de KID s’intègre aux interactions kinétochore–microtubule et au point de contrôle d’assemblage du fuseau afin de maintenir un alignement et une ségrégation chromosomiques appropriés. La dérégulation de ces processus contribue à l’instabilité chromosomique et à l’aneuploïdie, reliant ainsi le contrôle mitotique dépendant de KIF22 à des phénotypes du cycle cellulaire pertinents en oncologie et, plus largement, aux voies de maintien du génome.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO KID (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène KIF22 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du KIF22, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert KIF22 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine KID.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en KIF22 pour l'étude de la signalisation de KID, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de KIF22 essentiels à la fonction de KID
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de KIF22 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le KID plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le KID plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus KIF22. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le KID plasmide HDR (h) et le KID (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie KIF22 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles KIF22 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.