Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO KIBRA (h): sc-402677
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- KIBRA Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique KIBRA, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KIBRA Antibody (B-3): sc-518263
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO KIBRA (h) | sc-402677 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
WWC1 code KIBRA, une protéine d’échafaudage contenant des domaines WW, enrichie dans le cerveau et le rein, qui coordonne les interactions protéine–protéine via ses domaines WW et C2. KIBRA participe à la régulation de la voie Hippo grâce à des interactions avec les kinases LATS et d’autres composants apparentés, reliant la polarité cellulaire, l’inhibition de contact et le contrôle transcriptionnel de la prolifération et de l’apoptose. Elle s’interface également avec les voies de trafic membranaire et de remodelage du cytosquelette, soutenant des processus tels que l’endocytose et la migration dirigée. Une dérégulation de la signalisation WWC1/KIBRA a été associée à des altérations de la plasticité synaptique et a été étudiée dans le contexte du contrôle de la croissance lié au cancer ainsi qu’en neurobiologie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO KIBRA (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène WWC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du WWC1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert WWC1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine KIBRA.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en WWC1 pour l'étude de la signalisation de KIBRA, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de WWC1 essentiels à la fonction de KIBRA
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de WWC1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le KIBRA plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le KIBRA plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus WWC1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le KIBRA plasmide HDR (h) et le KIBRA (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie WWC1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles WWC1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.