Plásmido Doble Nickase (h) KDEL receptor 1: sc-402751-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)KDEL receptor 1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KDEL receptor 1 (h) y el plásmido de doble nickasa KDEL receptor 1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KDELR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) KDEL receptor 1 | sc-402751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) KDEL receptor 1 | sc-402751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDELR1 codifica el receptor KDEL 1, un receptor clave de recuperación del Golgi al RE que reconoce proteínas solubles del RE que portan la señal KDEL y mantiene la proteostasis del RE. Al acoplar la unión del ligando en el Golgi con el tráfico retrógrado mediado por COPI y la liberación dependiente del pH en el RE, KDELR1 ayuda a regular la vía secretora temprana, el control de calidad del RE y la señalización adaptativa al estrés. La alteración de la función de KDELR1 puede desorganizar la clasificación de proteínas y la homeostasis secretora, afectando procesos como la dinámica de la respuesta a proteínas mal plegadas y la fidelidad del tráfico intracelular. Las vías de transporte RE–Golgi y de proteostasis alteradas son ampliamente relevantes para la investigación sobre estrés celular, señalización inmunitaria y diversos fenotipos asociados al mal plegamiento de proteínas.
KDEL receptor 1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KDELR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KDELR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KDELR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KDELR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.