Plasmide Double Nickase (h) KCTD5: sc-409961-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KCTD5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KCTD5 Double Nickase (h) et le plasmide KCTD5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KCTD5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KCTD5 | sc-409961-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KCTD5 | sc-409961-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCTD5 code une protéine contenant un domaine BTB/POZ qui fonctionne comme adaptateur au sein des complexes de ligase E3 à ubiquitine dépendants de la Culline 3 (CUL3), en contribuant à conférer la spécificité de substrat pour l’ubiquitination et la dégradation dépendante du protéasome. En modulant la stabilité des protéines, KCTD5 participe à la protéostase et à des programmes de signalisation cellulaire qui influencent la prolifération, la différenciation et les réponses au stress. Une régulation altérée de la voie de l’ubiquitine et de l’activité des adaptateurs BTB–CUL3 constitue une caractéristique récurrente des cancers et des troubles neurobiologiques, faisant de KCTD5 un nœud utile pour étudier le remodelage des voies et des dépendances de signalisation spécifiques au contexte. L’étude de KCTD5 dans des cellules humaines peut éclairer la manière dont la dégradation ciblée s’articule avec le contrôle transcriptionnel et post-traductionnel dans des états pertinents pour la maladie.
KCTD5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KCTD5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KCTD5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KCTD5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KCTD5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.