Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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karyopherin 13 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404551
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- karyopherin 13 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico karyopherin 13, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: karyopherin 13 Anticuerpo (D-3): sc-271218
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
karyopherin 13 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404551 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IPO13 codifica la carioferina 13 (importina 13), un receptor bidireccional de transporte nuclear que media el transporte de cargas proteicas específicas a través del complejo del poro nuclear de manera dependiente de RanGTP. Al controlar la dinámica de importación y exportación nuclear, IPO13 influye en programas transcripcionales, la progresión del ciclo celular y la señalización de respuesta al estrés mediante la regulación de la localización y la disponibilidad de sus cargas. La alteración del transporte nucleocitoplasmático es una característica recurrente de la transformación oncogénica y de fenotipos neurodegenerativos, lo que convierte a IPO13 en un punto relevante para estudiar cómo la fidelidad del transporte moldea la regulación del genoma y la proteostasis. La función de IPO13 también es pertinente en las interacciones hospedador–patógeno y en la señalización de la inmunidad innata, donde el acceso nuclear de factores reguladores puede ser un paso limitante.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO karyopherin 13 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IPO13 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IPO13 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IPO13 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína karyopherin 13.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IPO13 para la investigación de la señalización de karyopherin 13, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IPO13 críticos para la función de karyopherin 13
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IPO13 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido karyopherin 13 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido karyopherin 13 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IPO13. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR karyopherin 13 (h) y el plásmido HDR karyopherin 13 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IPO13 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IPO13 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.