Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO karyopherin 13 (h): sc-404551
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- karyopherin 13 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique karyopherin 13, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: karyopherin 13 Antibody (D-3): sc-271218
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO karyopherin 13 (h) | sc-404551 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
IPO13 code la karyophérine 13 (importine‑13), un récepteur bidirectionnel de transport nucléaire qui assure, de manière dépendante de RanGTP, la navette de cargaisons protéiques spécifiques à travers le complexe du pore nucléaire. En contrôlant la dynamique d’import/export nucléaire, IPO13 influence les programmes transcriptionnels, la progression du cycle cellulaire et les voies de signalisation induites par le stress, via la régulation de la localisation et de la disponibilité de ses cargaisons. Une altération du transport nucléocytoplasmique est une caractéristique récurrente de la transformation oncogénique et de certains phénotypes neurodégénératifs, ce qui fait d’IPO13 un nœud pertinent pour étudier comment la fidélité du transport façonne la régulation du génome et la protéostasie. La fonction d’IPO13 est également importante dans les interactions hôte–pathogène et la signalisation immunitaire innée, où l’accès au noyau de facteurs régulateurs peut constituer une étape limitante.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO karyopherin 13 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène IPO13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du IPO13, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert IPO13 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine karyopherin 13.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en IPO13 pour l'étude de la signalisation de karyopherin 13, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de IPO13 essentiels à la fonction de karyopherin 13
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de IPO13 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le karyopherin 13 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le karyopherin 13 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus IPO13. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le karyopherin 13 plasmide HDR (h) et le karyopherin 13 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie IPO13 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles IPO13 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.