Plasmide Double Nickase (h) KAI 1: sc-401317-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KAI 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KAI 1 Double Nickase (h) et le plasmide KAI 1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CD82. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KAI 1 Antibody (G-10): sc-518002
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KAI 1 | sc-401317-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KAI 1 | sc-401317-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD82 (KAI1) est une glycoprotéine de surface cellulaire de la famille des tétraspanines, qui organise des microdomaines membranaires et régule l’adhésion, la motilité et la signalisation des récepteurs dépendantes des intégrines. En modulant les interactions entre tétraspanines, intégrines et récepteurs aux facteurs de croissance, KAI1 influence le remodelage du cytosquelette, l’endocytose et les voies en aval liées à la migration et à la survie cellulaires. Les altérations de l’expression ou de la localisation de CD82 sont fréquemment étudiées dans le contexte de la progression tumorale, de l’invasion et de la dissémination métastatique, ainsi que du trafic des cellules immunitaires et de la signalisation inflammatoire. Ces caractéristiques font de CD82 une cible utile pour disséquer l’architecture de la signalisation membranaire, la dynamique d’adhésion et les interactions entre voies dans des modèles de cellules humaines.
KAI 1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CD82 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CD82. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CD82. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CD82.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.