Plasmide Double Nickase (h) KA2: sc-405272-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KA2 Double Nickase (h) et le plasmide KA2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GRIK5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KA2 | sc-405272-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KA2 | sc-405272-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIK5 code la sous-unité KA2 du récepteur au kainate, un composant des récepteurs ionotropes du glutamate qui s’assemble avec d’autres sous-unités de récepteurs au kainate pour moduler la transmission synaptique excitatrice et l’excitabilité des réseaux neuronaux. KA2 contribue au fonctionnement des canaux cationiques activés par un ligand, influençant la plasticité synaptique, la modulation présynaptique et des voies de signalisation en aval liées au calcium et aux MAPK. Des altérations de la signalisation glutamatergique impliquant GRIK5 ont été étudiées dans des contextes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, notamment la susceptibilité aux crises et les dysfonctionnements des circuits, où la composition des récepteurs peut affecter l’équilibre excitation–inhibition. En tant que protéine membranaire synaptique, KA2 est également pertinente pour les études portant sur le trafic des récepteurs, la maturation des synapses et le remodelage dépendant de l’activité dans des modèles neuronaux humains.
KA2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GRIK5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GRIK5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GRIK5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GRIK5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.