Plásmido Doble Nickase (h) JNK2: sc-400115-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)JNK2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa JNK2 (h) y el plásmido de doble nickasa JNK2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MAPK9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: JNK2 Anticuerpo (A-7): sc-271133
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) JNK2 | sc-400115-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) JNK2 | sc-400115-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPK9 codifica la quinasa N-terminal de c-Jun 2 (JNK2), una quinasa MAP activada por estrés que fosforila factores de transcripción como c-JUN y ATF2 para coordinar la señalización inflamatoria, la apoptosis y el control del ciclo celular. JNK2 actúa aguas abajo de las MAP3K y MAP2K en la cascada JNK/MAPK, integrando señales procedentes de citocinas, estrés oxidativo, estrés del retículo endoplásmico y daño genotóxico para regular programas transcripcionales dependientes del contexto. Mediante la modulación de la actividad de AP-1 y la comunicación cruzada con vías asociadas a NF-κB y p53, MAPK9 influye en las respuestas inmunitarias, la señalización neuronal y la remodelación tisular. La desregulación de la señalización de JNK2 se ha implicado en la adaptación al estrés asociada al cáncer, procesos neurodegenerativos y fenotipos metabólicos e inflamatorios, lo que convierte a MAPK9 en un objetivo habitual en estudios mecanísticos de vías de señalización.
JNK2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAPK9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAPK9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAPK9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAPK9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.