Plasmide Double Nickase (h) JMJD3: sc-401883-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) JMJD3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide JMJD3 Double Nickase (h) et le plasmide JMJD3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KDM6B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) JMJD3 | sc-401883-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) JMJD3 | sc-401883-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDM6B code la déméthylase d’histones JMJD3, une enzyme du domaine Jumonji C (JmjC) qui enlève les marques répressives H3K27me3 afin de favoriser l’activation transcriptionnelle. En contrebalançant la méthylation médiée par PRC2/EZH2, JMJD3 contribue à réguler l’accessibilité de la chromatine lors de la différenciation, de l’induction de gènes inflammatoires et de programmes spécifiques de lignée en réponse à des signaux tels que NF-κB et les voies des cytokines. L’activité de KDM6B influence les transitions de destin cellulaire, la transcription associée à la sénescence et le remodelage épigénétique au cours du développement et de la réparation tissulaire. Une dérégulation de JMJD3 a été associée à des états inflammatoires aberrants et à des paysages transcriptionnels altérés dans des contextes cancéreux et neurodéveloppementaux, ce qui en fait une cible utile pour la recherche mécanistique en épigénétique.
JMJD3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KDM6B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KDM6B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KDM6B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KDM6B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.