JDP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406888

Übersicht

JDP2 (Jun-Dimerisierungsprotein 2) ist ein basischer Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor, der die AP-1–abhängige Genexpression moduliert, indem er mit Mitgliedern der JUN/FOS-Familie heterodimerisiert und über Wechselwirkungen mit histonmodifizierenden Komplexen die Chromatinstruktur beeinflusst. Es wirkt als kontextabhängiger Regulator zellulärer Programme wie Differenzierung, Zellzykluskontrolle, Stressantworten und Apoptose; zudem wurden Rollen in der Signalübertragung bei oxidativem Stress und in entzündlichen transkriptionellen Netzwerken beschrieben. Indem JDP2 transkriptionelle Outputs nachgeschaltet an MAPK- und andere stimulusresponsive Signalwege formt, trägt es zur Linienfestlegung und zu adaptiven Antworten auf Umweltreize bei. Eine fehlregulierte Expression oder Aktivität von JDP2 wurde mit veränderten Proliferations- und Überlebensphänotypen in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie und immunbezogene Prozesse relevant sind, was es zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien der Transkriptionsregulation macht.

Das JDP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des JDP2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des JDP2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von JDP2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die JDP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von JDP2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der JDP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf JDP2-Exone abzielen, die für die JDP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere JDP2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom JDP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom JDP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des JDP2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das JDP2 HDR-Plasmid (h) und JDP2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von JDP2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten JDP2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.