Plasmide Double Nickase (h) JAZF1: sc-404839-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) JAZF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide JAZF1 Double Nickase (h) et le plasmide JAZF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant JAZF1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: JAZF1 Antibody (C-11): sc-376503
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) JAZF1 | sc-404839-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) JAZF1 | sc-404839-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JAZF1 (juxtaposed with another zinc finger protein 1) code un régulateur transcriptionnel à doigts de zinc impliqué dans le contrôle de programmes d’expression génique liés au métabolisme cellulaire et à la différenciation. Il a été associé à la signalisation des récepteurs nucléaires et à des réseaux de co‑régulation transcriptionnelle qui façonnent la biologie des adipocytes et des îlots pancréatiques. Les variations génétiques de JAZF1 sont liées à une susceptibilité au diabète de type 2 et à des traits métaboliques apparentés, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude de l’homéostasie du glucose et de la fonction endocrinienne. JAZF1 a également été étudié dans le contexte de la biologie du cancer et des réarrangements chromosomiques, ce qui en fait un outil utile pour explorer les mécanismes de dérégulation transcriptionnelle dans des modèles pertinents pour la maladie.
JAZF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus JAZF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de JAZF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de JAZF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de JAZF1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.