Plasmide Double Nickase (h) JAK1: sc-400439-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) JAK1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide JAK1 Double Nickase (h) et le plasmide JAK1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant JAK1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: JAK1 Antibody (B-3): sc-376996
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) JAK1 | sc-400439-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) JAK1 | sc-400439-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La Janus kinase 1 (JAK1) est une tyrosine kinase non réceptrice qui couple les récepteurs des cytokines à des programmes transcriptionnels en aval, principalement via la voie JAK–STAT. Dans les cellules humaines, JAK1 est indispensable à la signalisation des interférons de type I et de type II ainsi que de multiples interleukines, en permettant la phosphorylation des protéines STAT et la coordination des réponses immunitaires innées et adaptatives. L’activité de JAK1 s’articule également avec les voies MAPK et PI3K/AKT, influençant la prolifération, la différenciation et l’apoptose de manière dépendante du contexte. Une signalisation JAK1 dérégulée a été impliquée dans des phénotypes associés à l’inflammation, l’échappement immunitaire et des signaux de croissance aberrants, ce qui en fait un nœud fréquent pour les études mécanistiques en immunologie et en biologie du cancer.
JAK1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus JAK1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de JAK1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de JAK1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de JAK1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.