Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ITM2B (m): sc-421189
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ITM2B Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ITM2B, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ITM2B Antibody (C-8): sc-374362
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ITM2B (m) | sc-421189 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Itm2b code la protéine membranaire intégrale ITM2B (également appelée BRI2), une protéine transmembranaire de type II impliquée dans le trafic membranaire et la maturation protéolytique au sein des systèmes sécrétoire et endolysosomal. ITM2B participe à l’homéostasie neuronale et a été associée à la régulation de la production de peptides amyloïdogènes via des interactions influençant le processing de l’APP. Chez la souris, l’expression de Itm2b est enrichie dans le système nerveux et sert à étudier les voies qui gouvernent le maintien synaptique, le contrôle qualité des protéines et la fonction lysosomale. Des altérations de la biologie d’ITM2B sont associées à des phénotypes liés à la neurodégénérescence et constituent un point d’entrée mécanistique pour explorer les déséquilibres de la protéostasie et la neuropathologie liée au vieillissement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ITM2B (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Itm2b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Itm2b, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Itm2b à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ITM2B.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Itm2b pour l'étude de la signalisation de ITM2B, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Itm2b essentiels à la fonction de ITM2B
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Itm2b pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ITM2B plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ITM2B plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Itm2b. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ITM2B plasmide HDR (m) et le ITM2B (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Itm2b pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Itm2b définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.