Plasmide Double Nickase (h) ITI-H3: sc-404269-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ITI-H3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ITI-H3 Double Nickase (h) et le plasmide ITI-H3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITIH3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ITI-H3 | sc-404269-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ITI-H3 | sc-404269-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITIH3 code la chaîne lourde 3 de l’inhibiteur inter-α-trypsine (ITI‑H3), une protéine associée à la matrice extracellulaire qui contribue à la stabilisation des matrices riches en hyaluronane grâce à des réactions de transfert covalent médiées par le système inter‑α‑inhibiteur. En façonnant l’architecture de la matrice péricellulaire, ITI‑H3 influence l’adhérence cellulaire, la migration et les processus de remodelage tissulaire, à l’interface de la signalisation inflammatoire et des voies de réponse aux lésions. Des altérations de l’expression d’ITIH3 ou de son incorporation dans la matrice ont été rapportées dans des contextes de fibrose, d’inflammation chronique et de remodelage du microenvironnement tumoral, ce qui étaye son intérêt en tant que nœud mécanistique reliant la dynamique de la MEC à des phénotypes associés aux maladies. En recherche biomédicale, ITIH3 est couramment étudié pour ses rôles dans les interactions stroma–épithélium, la fonction barrière et la régulation des protéases extracellulaires.
ITI-H3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITIH3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITIH3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITIH3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITIH3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.