Plasmide Double Nickase (h) ISYNA1: sc-404785-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ISYNA1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ISYNA1 Double Nickase (h) et le plasmide ISYNA1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ISYNA1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ISYNA1 Antibody (C-9): sc-271830
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ISYNA1 | sc-404785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ISYNA1 | sc-404785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ISYNA1 code la myo‑inositol‑3‑phosphate synthase 1, l’enzyme limitante qui convertit le glucose‑6‑phosphate en inositol‑3‑phosphate, initiant la biosynthèse de novo du myo‑inositol. Cette activité fournit l’inositol nécessaire à la production de phosphatidylinositol et de phosphates d’inositol, soutenant la biogenèse membranaire et la dynamique de signalisation liée à PI3K/AKT, le trafic vésiculaire et l’homéostasie osmotique. Le métabolisme de l’inositol dépendant d’ISYNA1 contribue à l’adaptation au stress cellulaire et influence les programmes métaboliques des lipides et des glucides. La dérégulation des voies de l’inositol et des phosphoinositides est impliquée en neurobiologie et dans des phénotypes métaboliques, ce qui fait d’ISYNA1 un nœud utile pour des études mécanistiques de la signalisation et des processus associés aux membranes.
ISYNA1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ISYNA1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ISYNA1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ISYNA1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ISYNA1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.