Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ISYNA1 (h): sc-404785
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ISYNA1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ISYNA1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ISYNA1 Antibody (C-9): sc-271830
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ISYNA1 (h) | sc-404785 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ISYNA1 (inositol-3-phosphate synthase 1) code l’enzyme limitante qui convertit le glucose-6-phosphate en myo-inositol-3-phosphate, constituant un point d’entrée clé dans la biosynthèse de novo du myo-inositol. Le myo-inositol fournit des précurseurs pour le phosphatidylinositol et les lipides de signalisation phosphoinositides, qui régulent le trafic membranaire, la signalisation couplée aux récepteurs, la dynamique du cytosquelette et l’homéostasie intracellulaire du calcium. Par sa contribution au métabolisme PI/PI(4,5)P2/PI(3,4,5)P3, ISYNA1 influence des voies telles que PI3K–AKT et la signalisation pilotée par la PLC, qui façonnent la prolifération, les réponses au stress et la différenciation. Des altérations de l’homéostasie de l’inositol et des phosphoinositides ont été impliquées dans des phénotypes métaboliques et neurodéveloppementaux, faisant d’ISYNA1 une cible utile pour des études mécanistiques de la signalisation et de la dynamique membranaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ISYNA1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ISYNA1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ISYNA1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ISYNA1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ISYNA1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ISYNA1 pour l'étude de la signalisation de ISYNA1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de ISYNA1 essentiels à la fonction de ISYNA1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ISYNA1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ISYNA1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ISYNA1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ISYNA1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ISYNA1 plasmide HDR (h) et le ISYNA1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ISYNA1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ISYNA1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.