Plasmide CRISPR/Cas9 KO IRX5 (h): sc-404838
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IRX5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IRX5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IRX5 Antibody (IRX5C10G5): sc-81102
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IRX5 (h) | sc-404838 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
IRX5 code la protéine homeobox Iroquois 5, un facteur de transcription spécifique de séquence qui régule la mise en place des patrons de développement et les décisions de destin cellulaire via le contrôle de programmes d’expression génique. Dans les cellules humaines, l’activité d’IRX5 contribue à la spécification des lignages, à la morphogenèse tissulaire et au maintien des états différenciés en modulant des réseaux transcriptionnels qui s’articulent avec des voies de signalisation du développement. Une expression dérégulée d’IRX5 a été associée à des phénotypes de prolifération et de différenciation altérés, soulignant sa pertinence pour les études de biologie tumorale et de troubles du développement. En tant que régulateur nucléaire, IRX5 est couramment étudié pour son impact sur le contrôle transcriptionnel associé à la chromatine et sur l’organisation des voies de signalisation en aval.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IRX5 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène IRX5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du IRX5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert IRX5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IRX5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en IRX5 pour l'étude de la signalisation de IRX5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de IRX5 essentiels à la fonction de IRX5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de IRX5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IRX5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le IRX5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus IRX5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IRX5 plasmide HDR (h) et le IRX5 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie IRX5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles IRX5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.