Plasmide Double Nickase (m) IRF-7: sc-424785-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IRF-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IRF-7 Double Nickase (m) et le plasmide IRF-7 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Irf7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IRF-7 Antibody (F-1): sc-74471
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IRF-7 | sc-424785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IRF-7 | sc-424785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Irf7** code le facteur régulateur des interférons 7 (IRF‑7), un facteur de transcription qui agit comme un amplificateur central des réponses aux interférons de type I en aval des récepteurs de reconnaissance de motifs. Lors de son activation par des voies incluant TLR7/9–MyD88 et RIG‑I/MDA5–MAVS, IRF‑7 est phosphorylé par des kinases telles que TBK1 et IKKε, transloque vers le noyau et induit des programmes de gènes stimulés par l’interféron. Cet axe de signalisation module l’immunité antivirale et l’expression de gènes inflammatoires, et une activité dérégulée d’IRF‑7 est impliquée dans une altération de la défense de l’hôte ainsi que dans une immunopathologie dépendante des interférons. **Irf7** est donc largement étudié dans la signalisation de l’immunité innée, la régulation des cytokines et les modèles d’infection et d’inflammation systémique.
IRF-7 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Irf7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Irf7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Irf7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Irf7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.