Plasmide Double Nickase (h) IRF-7: sc-400450-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IRF-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IRF-7 Double Nickase (h) et le plasmide IRF-7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IRF7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IRF-7 Antibody (F-1): sc-74471
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IRF-7 | sc-400450-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IRF-7 | sc-400450-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le facteur régulateur des interférons 7 (IRF7) code IRF-7, un régulateur transcriptionnel majeur des réponses aux interférons de type I, en aval de récepteurs de reconnaissance des motifs tels que les récepteurs de type RIG-I et les récepteurs de type Toll (TLR). Lorsqu’il est activé par la détection d’acides nucléiques viraux, IRF-7 est phosphorylé puis transloqué vers le noyau, où il induit l’expression de l’IFN-α/β et des gènes stimulés par les interférons, façonnant l’immunité innée antivirale et la signalisation inflammatoire. IRF7 intègre la signalisation via TBK1/IKKε et coopère avec NF-κB pour coordonner des réseaux de cytokines qui influencent l’activation des cellules immunitaires et la présentation de l’antigène. Une activité d’IRF7 dérégulée a été associée à une défense antivirale altérée et à des signatures d’interféron aberrantes observées dans divers troubles à médiation immunitaire et des pathologies liées à l’inflammation, ce qui en fait une cible fréquente d’études mécanistiques sur le contrôle des voies de l’interféron.
IRF-7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IRF7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IRF7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IRF7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IRF7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.