Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IRF-5 (m): sc-424184
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IRF-5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IRF-5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IRF-5 Antibody (10T1): sc-56714
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IRF-5 (m) | sc-424184 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Irf5** code le facteur régulateur de l’interféron 5 (IRF-5), un facteur de transcription qui fait le lien entre la détection immunitaire innée et les programmes géniques inflammatoires en aval. IRF-5 est activé en aval des récepteurs Toll endosomaux et de la signalisation dépendante de MyD88, et favorise l’expression des interférons de type I ainsi que de réseaux de cytokines pro-inflammatoires via une régulation coordonnée des gènes stimulés par l’interféron. Dans les macrophages, les cellules dendritiques et les lymphocytes B, IRF-5 contribue à la polarisation et aux réponses effectrices, en modulant l’équilibre des cytokines et l’immunité induite par les antigènes. Une activité d’IRF-5 dérégulée a été associée à des phénotypes auto-immuns et inflammatoires, faisant d’**Irf5** un point d’entrée utile pour disséquer des voies pertinentes pour la dérégulation immunitaire systémique dans des modèles murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IRF-5 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Irf5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Irf5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Irf5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IRF-5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Irf5 pour l'étude de la signalisation de IRF-5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Irf5 essentiels à la fonction de IRF-5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Irf5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IRF-5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le IRF-5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Irf5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IRF-5 plasmide HDR (m) et le IRF-5 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Irf5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Irf5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.