IRF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421146-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IRF-1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IRF-1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase IRF-1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Irf1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IRF-1 Anticorpo (E-4): sc-514544
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IRF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421146-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Irf1** de camundongo codifica o fator regulador de interferon 1 (IRF-1), um fator de transcrição nuclear induzido por interferons do tipo I e do tipo II que integra sinais de citocinas e de detecção de patógenos em programas de expressão gênica. O IRF-1 coordena funções imunes inatas e adaptativas ao regular genes estimulados por interferon, a maquinaria de apresentação de antígenos e redes transcricionais pró-inflamatórias a jusante de JAK/STAT e vias de sinalização relacionadas. Também contribui para o controle do ciclo celular e a apoptose, conectando a ativação imune à regulação do crescimento e às respostas ao estresse. A atividade desregulada de IRF-1 está implicada em alterações na defesa antiviral, na inflamação mediada pelo sistema imune e nas interações entre tumor e sistema imune, tornando **Irf1** um alvo comum em estudos mecanísticos de imunologia e biologia do câncer.
IRF-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Irf1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Irf1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Irf1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Irf1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.