IRE1β CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424138

개요

Ern2는 소포체(ER)에 상주하는 막관통 키나아제/엔도리보뉴클레이스로서, 미접힘 단백질 반응(UPR)에서 스트레스 센서로 기능하는 이노시톨-요구 효소 1 베타(IRE1β)를 암호화한다. ER 스트레스가 발생하면 IRE1β는 조절된 IRE1 의존적 RNA 분해(RIDD)와 Xbp1 mRNA 스플라이싱 조절을 통해 ER 항상성 유지에 기여하며, 분비 능력, 상피 분화, 염증성 신호전달에 영향을 준다. 마우스에서 Ern2는 점막 및 분비성 상피에서 높게 발현되며, 장벽 형성과 뮤신 관련 프로그램과 단백질 접힘 수요를 조율하는 데 도움을 준다. IRE1β가 관여하는 ER 스트레스 경로의 이상 조절은 장 염증, 점액층 결함, 숙주–미생물 상호작용, 그리고 상피 조직에서의 대사 스트레스 표현형 연구와 관련이 있다.

IRE1β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ern2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ern2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ern2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 IRE1β 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 IRE1β 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ern2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• IRE1β 기능에 중요한 Ern2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ern2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• IRE1β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 IRE1β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ern2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  IRE1β HDR 플라스미드 (m) 및 IRE1β HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ern2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ern2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.