Plasmide Double Nickase (h) Integrin αX/ITGAX/CD11c: sc-401765-NIC

ITGAX code l’intégrine αX (CD11c), qui s’hétérodimérise avec l’intégrine β2 (CD18) pour former le récepteur du complément 4 (CR4), un récepteur clé d’adhésion et de reconnaissance présent sur les cellules dendritiques, les monocytes, les macrophages et certains sous-ensembles de neutrophiles. CD11c médie l’adhésion, la migration et la phagocytose des leucocytes en se liant à des ligands tels que des particules opsonisées par iC3b et le fibrinogène, en coordonnant une signalisation « outside-in » en interface avec le remodelage du cytosquelette et des programmes transcriptionnels inflammatoires. Via une signalisation dépendante des intégrines et des interactions croisées avec les récepteurs de l’immunité innée, ITGAX contribue à la capture d’antigènes, aux interactions cellule–cellule et à l’orientation des réponses immunitaires adaptatives. Les altérations de l’expression et de la fonction de CD11c sont étudiées dans des contextes incluant l’inflammation chronique, l’auto-immunité, la biologie myéloïde associée aux tumeurs et une surveillance immunitaire tissulaire dérégulée.

Integrin αX/ITGAX/CD11c Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITGAX dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITGAX. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITGAX. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITGAX.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.