Integrin α9/ITGA9 Double Nickase Plasmid (h): sc-402221-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Integrin α9/ITGA9 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Integrin α9/ITGA9 Double-Nickase-Plasmid (h) und Integrin α9/ITGA9 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ITGA9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Integrin α9/ITGA9 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402221-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α9/ITGA9 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402221-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane ITGA9-Gen kodiert Integrin α9, eine α‑Untereinheit, die vorwiegend mit β1 heterodimerisiert und dadurch einen Zelloberflächenrezeptor bildet, der die Adhäsion an Liganden der extrazellulären Matrix sowie an Leitsignale vermittelt. Integrin α9/ITGA9 koordiniert Outside‑in‑ und Inside‑out‑Signalübertragung, die über Signalwege unter Beteiligung von FAK/Src, PI3K–AKT und MAPK das Zytoskelett‑Remodeling, den Umsatz fokaler Adhäsionen und die gerichtete Zellmigration beeinflusst. Durch die Regulation von Zell‑Matrix‑Interaktionen trägt ITGA9 zu Prozessen wie der Motilität epithelialer und mesenchymaler Zellen, Gewebeumbau sowie lymphatischen und neuronenassoziierten Antworten bei. Eine fehlregulierte Integrin‑Signalgebung und veränderte ITGA9‑Expression wurden u. a. im Zusammenhang mit Entzündung, Fibrose sowie tumorassoziierter Invasion und Metastasierung untersucht und sind daher für mechanistische Studien zur adhäsionsabhängigen Signalübertragung relevant.
Integrin α9/ITGA9 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ITGA9-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ITGA9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ITGA9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ITGA9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.