Plasmide Double Nickase (h) Integrin α9/ITGA9: sc-402221-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Integrin α9/ITGA9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin α9/ITGA9 Double Nickase (h) et le plasmide Integrin α9/ITGA9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITGA9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Integrin α9/ITGA9 | sc-402221-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Integrin α9/ITGA9 | sc-402221-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain ITGA9 code l’intégrine α9, une sous-unité α qui s’hétérodimérise principalement avec β1 pour former un récepteur de surface cellulaire médiant l’adhésion à des ligands de la matrice extracellulaire et à des signaux de guidage. L’intégrine α9/ITGA9 coordonne des signalisations « outside-in » et « inside-out » qui influencent le remodelage du cytosquelette, le renouvellement des adhésions focales et la migration cellulaire dirigée via des voies impliquant FAK/Src, PI3K–AKT et la signalisation MAPK. En régulant les interactions cellule–matrice, ITGA9 contribue à des processus tels que la motilité des cellules épithéliales et mésenchymateuses, le remodelage tissulaire et des réponses associées aux systèmes lymphatique et nerveux. Une signalisation des intégrines dérégulée et une expression modifiée d’ITGA9 ont été étudiées dans des contextes incluant l’inflammation, la fibrose et l’invasion ainsi que la métastase associées aux tumeurs, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la signalisation dépendante de l’adhésion.
Integrin α9/ITGA9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITGA9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITGA9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITGA9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITGA9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.