Plasmide Double Nickase (h) Integrin β8/ITGB8: sc-401379-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Integrin β8/ITGB8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin β8/ITGB8 Double Nickase (h) et le plasmide Integrin β8/ITGB8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITGB8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Integrin β8/ITGB8 Antibody (E-6): sc-514150
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Integrin β8/ITGB8 | sc-401379-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Integrin β8/ITGB8 | sc-401379-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB8 code l’intégrine β8, une sous-unité de récepteur d’adhérence transmembranaire à passage unique qui s’associe à l’intégrine αV pour former αVβ8, reliant des ligands de la matrice extracellulaire aux réseaux intracellulaires du cytosquelette et de signalisation. αVβ8 est un régulateur majeur de l’activation du TGF-β latent à la surface cellulaire, façonnant des programmes transcriptionnels dépendants des SMAD qui influencent les interactions épithélio-mésenchymateuses, la modulation immunitaire et le remodelage tissulaire. Via la signalisation « outside-in » médiée par les intégrines et la dynamique des adhésions focales, ITGB8 contribue à l’adhérence cellulaire, à la migration et à l’organisation des barrières. Une expression dérégulée d’ITGB8 ou une activité altérée de αVβ8 a été associée à des états de signalisation du TGF-β modifiés, observés dans des contextes tels que le remodelage du microenvironnement tumoral, les processus fibrotiques et le développement neurovasculaire.
Integrin β8/ITGB8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITGB8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITGB8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITGB8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITGB8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.